Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®
——DNA高效建库
 
1、研发背景
快速精准建库产品，您用对了吗？
DNA文库制备是高通量测序的核心环节，文库的产量与质量直接决定了测序数据的产量与质量。随着NGS技术在测序通量、成本以及应用领域方面的不断发展，DNA建库的方法也在不断作相应的优化与改进，以使其更简单、更快速、更高性价比以及更易实现自动化，以满足更多的市场需求。但目前市面上多数试剂盒的建库方法，仍然是耗时、昂贵且操作非常繁琐的。当然，其中不乏有一些方法能够实现相对较快的文库制备，如将DNA末端磷酸化、加A尾及接头连接等步骤合并进行，或者基于转座酶技术在单管内实现片段化和接头添加等步骤，但部分这些方法在性能方面却存在一定的缺陷：如仅适用于DNA量充足且品质较好的样本，只能将少量的Input DN**段化，常出现形成G尾、聚合物等副反应，或表现出一定的偏好性等，这些情况的产生显著降低了DNA文库的转化率、复杂度，并且极大影响后续测序数据在覆盖度、准确度等方面的质量。
Yeasen MaxUp，您的更优之选！
翊圣生物根据现状，为更好的满足市场需求，集中海内外高通量测序领域的优秀科研人员，历时数年，开发了Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®常规DNA建库试剂盒，从产品设计，产品原料选用，产品性能优化，产品性能验证，产品标准制定，到产品成型，产品规模化生产，每一步都在严苛的标准、精细的研究中，不断实现产品质的飞跃。
Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®在文库产量与质量方面表现卓越：DNA的文库转化率相对进口同款品牌至少高出20%，获得更高的文库产量所需的扩增循环数更低，且经测序检测其无偏好性，此外，在建库速度上、简便性、性价比以及样本适用性方面，不逊于国际一流产品。
2、产品描述
Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®是针对Illumina®高通量测序平台专业开发设计的建库试剂盒。本试剂盒可将低至1 ng的微量片段化DNA制备成适用于Illumina®测序平台的专用文库。Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®整合了多个酶反应步骤，提供简并的、线性化的操作方案，显著提高DNA建库效率。此外，Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®使用精心优化的配方体系，广泛适用于各种DNA样本。
翊圣生物具有严格的生产工艺，保证提供的每批次产品都经过严格的质量控制和功能验证，最高程度保障产品优异性能与批间稳定性。
1）2.75小时高效建库
Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®整合了多个酶反应步骤，提供简并的、线性化的操作方案，将DNA建库时间缩短至2.75小时以内，并显著降低手动操作时间。
     
图1 Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®相对进口品牌N*同类型产品，建库更快。
2）文库转化率高
文库转化率，即DN**段转化为双端带特定接头DN**段的效率，是衡量建库试剂盒效率的重要指标。文库转化率强烈影响文库的多样性和质量，文库转化率高在一定程度上意味着测序覆盖度更好。
 
图2 Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®相对进口品牌N同类型产品具有更高的文库转化率。
样本：片段化E.coli gDNA。接头比例：按各款试剂盒中推荐的数值。测定方法：连接完整接头后，qPCR文库定量。
3）建库循环数少
获得特定产量文库所需的PCR循环数，是衡量试剂盒建库效率的另一重要指标。PCR循环数不足，可能造成文库产量低；PCR循环数过高，又将导致文库偏好性增加、重复度增加、嵌合产物增加、扩增突变积累等多种不良后果。?获得相同产量文库时，使用的PCR循环数越少，表示试剂盒的建库效率更高。
表1 Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®相对进口品牌N*同类型产品具有更高的建库效率。

    

        

            

            
Input DNA（ng）
            
            

            
Number of cycles required to generate
            
        
        

            

            
100 ng
            
            

            
1000 ng
            
        
        

            

            
Yeasen MaxUp
            
            

            
品牌N* 
            
            

            
Yeasen MaxUp
            
            

            
品牌N*
            
        
        

            

            
500
            
            

            
0
            
            

            
1-2
            
            

            
3-4
            
            

            
3-4
            
        
        

            

            
100
            
            

            
3-4
            
            

            
5-7
            
            

            
7-8
            
            

            
8-9
            
        
        

            

            
50
            
            

            
6-7
            
            

            
7-9
            
            

            
8-9
            
            

            
11-13
            
        
        

            

            
10
            
            

            
9-10
            
            

            
11-13
            
            

            
12-13
            
            

            
14-16
            
        
        

            

            
1
            
            

            
12-14
            
            

            
-
            
            

            
16-17
            
            

            
-
            
        
    

4）优异的文库质量
使用Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®对100 ng E.coli gDNA建库，所得文库均为单一条带，正态分布，无杂峰，片段大小符合测序要求。
 
图3 Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®所建文库Agilent 2100 Bioanalyzer检测。
建库样本：片段化E. coli gDNA。双轮分选比例（Post-adapter Ligation）：0.6×/0.2×和0.55×/0.15×。
5）卓越的测序质量

测序数据是反映建库试剂盒性能的最重要指标。使用Hieff NGSTM MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina®和N*品牌同类型产品用于大肠杆菌基因组DNA文库构建，并使用Illumina® Hiseq 4000平台，以PE150模式进行测序。所得Q30、碱基质量，Mapped Reads以及Coverage等方面均与品牌N*同类型产品相当，表现优异。
表2 大肠杆菌K12菌株基因组DNA测序数据统计。


 
图4 100 ng_Yeasen样品测序数据Fastqc报告（左：序列质量分布；右：碱基分布）。

6）最优的性价比
Yeasen致力于为您提供性价比最高的产品！！
 
图5 Hieff NGS